單層膠體晶體及反蛋白質(zhì)納米陣列結(jié)構(gòu)的制備

1.4蛋白質(zhì)工程的崛起(52張PPT)

文章概述了蛋白質(zhì)工程常用策略和用這些策略來改造工業(yè)用酶的基本特性(包括穩(wěn)定性、活性、選擇性和表面特性)及其在工業(yè)用酶中的應(yīng)用,并對其發(fā)展做了展望。

目的　探討用于制備蛋白質(zhì)芯片的4種玻璃表面修飾方法對蛋白質(zhì)的固定能力。方法　從蛋白質(zhì)固定效率和固定蛋白質(zhì)的反應(yīng)性2個方面,對戊二醛修飾法、瓊脂糖修飾法、巰基修飾法和聚賴氨酸修飾法進(jìn)行比較。結(jié)果　4種修飾方法中聚賴氨酸修飾玻片對蛋白質(zhì)的固定量較大,比醛基修飾的玻片約高315%;與醛基修飾相比,其反應(yīng)性約高266%。結(jié)論　聚賴氨酸修飾的玻片較適合于制備蛋白質(zhì)芯片。

分別采用3-氨基丙基-三甲氧基硅烷、戊二醛、多聚賴氨酸、聚丙烯酰胺、瓊脂糖、硝化纖維修飾玻璃表面,對6種不同修飾表面制備的蛋白質(zhì)芯片進(jìn)行對比研究,探討制備蛋白質(zhì)芯片的合適玻璃表面修飾方法.利用原子力學(xué)顯微鏡對其表面進(jìn)行表征,通過點樣蛋白于修飾后的玻片表面制備蛋白質(zhì)芯片,比較不同修飾表面對蛋白質(zhì)的固定效率和固定效果.結(jié)果發(fā)現(xiàn):氨基、醛基、聚賴氨酸修飾玻片為二維平面結(jié)構(gòu),瓊脂糖、聚丙烯酰胺、硝化纖維修飾玻片其表面不僅有多孔結(jié)構(gòu),而且有一定厚度;瓊脂糖修飾玻片所得的熒光強度最高,背景較低,是一種理想的制備蛋白質(zhì)芯片的表面修飾方法.

第八章蛋白質(zhì)分選與膜泡運輸

人工神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)(ann)作為一種新型的信息處理系統(tǒng)和計算系統(tǒng),近年來被廣泛的應(yīng)用于蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)預(yù)測、譜圖分析、藥物分子藥效預(yù)測、定量構(gòu)效關(guān)系(qsar)研究等方面。文章論述了人工神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)的的工作原理和基本特點,列舉了國內(nèi)研究者運用人工神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)在蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)預(yù)測和qsar中的主要應(yīng)用,并對以后的應(yīng)用進(jìn)行了展望。

蛋白質(zhì)工程及植物基因工程國家重點實驗室

纖維素是一種重要的生物質(zhì)能,極具應(yīng)用前景。然而纖維素酶活性低、穩(wěn)定性差、生產(chǎn)成本高等問題制約了纖維素生物質(zhì)能的開發(fā)利用。目前,對現(xiàn)有纖維素酶進(jìn)行蛋白質(zhì)工程改造研究是改變這一現(xiàn)狀的重要途徑。該文對纖維素酶的蛋白質(zhì)工程改造的研究進(jìn)展作簡要綜述。

對大葉紫薇果仁蛋白質(zhì)與氨基酸進(jìn)行了研究,測得果仁粗蛋白的含量為10.2%,其蛋白質(zhì)組成為:清蛋白3.31%、球蛋白1.43%、醇溶蛋白2.09%、谷蛋白1.54%;含有18種氨基酸,其中有營養(yǎng)必需的8種氨基酸.并根據(jù)模式蛋白質(zhì),應(yīng)用化學(xué)分析法對果仁蛋白質(zhì)營養(yǎng)價值進(jìn)行了評價。

蛋白質(zhì)工程及植物基因工程國家重點實驗室

本文從改良熱穩(wěn)定性、最適ｐｈ、催化效率和底物專一性等方面介紹了用蛋白質(zhì)工程方法設(shè)計和改造工業(yè)用酶的研究及其進(jìn)展．討論了蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能關(guān)系和蛋白質(zhì)工程研究的前景．

微小毛霉凝乳酶(mpc)是微生物凝乳酶的主要來源之一。本研究將微小毛霉凝乳酶基因克隆到表達(dá)載體pet30a中并轉(zhuǎn)化宿主bl21(de3),使微小毛霉凝乳酶蛋白在大腸桿菌中表達(dá)。通過易錯pcr技術(shù)對mpc進(jìn)行隨機突變建庫,從中篩選出兩株具有優(yōu)良蛋白特性的突變體,為蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能研究以及菌種改造奠定基礎(chǔ)。

本文從改良熱穩(wěn)定性，最適ｐｈ，催化效率和底物專一性等方面介紹了用蛋白質(zhì)工程方法設(shè)計和改造工業(yè)酶的研究及其進(jìn)展，討論了蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)與功能關(guān)系和蛋白質(zhì)工程研究的前景。

將一種新型的以嫩江蛋白石頁巖為主的納米級蛋白石負(fù)離子添加劑添加到天然橡膠、顆粒橡膠、丁苯橡膠、標(biāo)準(zhǔn)橡膠、順丁橡膠等各種橡膠中,對橡膠進(jìn)行改性.測試結(jié)果表明,添加劑能夠均勻地分散在橡膠基體中,得到的納米復(fù)合材料產(chǎn)物不僅能夠釋放大量的負(fù)離子,而且具有良好的力學(xué)性能,橡膠的硬度有明顯的提高.所制備的橡膠材料是一種環(huán)保型健康的新型功能材料.

介紹了一種sol-gel方法合成plzt反蛋白石結(jié)構(gòu)。以單分散的聚苯乙烯亞微米球人造蛋白石為模板,通過調(diào)整的溶膠-凝膠方法制備plzt溶膠,再將溶膠前驅(qū)體填充在模板中。填充后的模板緩慢升溫到750℃煅燒,排除有機成分并使plzt結(jié)晶。通過這種方法,可以借助微球直徑為400nm的模板得到孔隙直徑在280nm的plzt反蛋白石結(jié)構(gòu)材料。

蛋白質(zhì)(酶)的改造和設(shè)計是人類面對紛繁復(fù)雜自然界的一個重大挑戰(zhàn),是自然進(jìn)化的突發(fā)事件,是人類不斷掌握自然規(guī)律的必然結(jié)果,對人類更深入地了解蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)與功能,促進(jìn)生物蛋白工業(yè)生產(chǎn)具有重大的意義。本文介紹了新型蛋白質(zhì)(酶)改造和設(shè)計的新思路和實施過程,以及目前生物酶改造和設(shè)計的一些前沿研究團(tuán)隊和研究成果,以期為生物酶或蛋白質(zhì)的改造與設(shè)計提供借鑒。

采用陽極氧化法在鈦表面制備不同管徑的tio2納米管,450℃熱處理后經(jīng)牛血清白蛋白(bsa)與鈣磷的共沉積得到載有bsa的羥基磷灰石(ha)涂層.經(jīng)檢測發(fā)現(xiàn),170nm管徑的tio2表面比100和50nm管徑的表面具備更好的礦化能力,ha的形成能力隨管徑的增大而提高.大管徑表面得到的涂層結(jié)合強度高于小管徑的,可達(dá)16.95mpa.經(jīng)過真空預(yù)礦化的試樣,涂層結(jié)合強度明顯高于未經(jīng)過預(yù)礦化的試樣,且ha涂層生長速率加快.bsa與磷酸鈣在真空預(yù)礦化后共沉積到氧化鈦納米管表面,短時期內(nèi)形成bsa-ha涂層,是在鈦基生物材料表面制備生物活性涂層的有效方法.

利用定氮儀測定樣品中蛋白質(zhì)含量的操作方法 1、樣品消化： 100ml消化瓶中+樣品（固體0.2~2.0g，液體10~20ml）+催化劑（硫酸鉀6g、 硫酸銅0.2g）+濃h2so420ml，混合加熱至澄清透明的藍(lán)綠色溶液，即消化液。 將消化液冷卻，移入100ml容量瓶定容備用。 2、定氮儀的準(zhǔn)備 （1）觀察蒸發(fā)爐內(nèi)水位，不能超過不銹鋼電極。（如果超過，請先把水排完） （2）關(guān)掉排水閥，打開主電源，打開冷卻水，打開綠色蒸汽開關(guān)，然后觀察 電流表。燈電流表指針升到4a（安培）左右，關(guān)掉蒸汽開關(guān)。待其回到0a（安 培）后再打開蒸汽開關(guān)。電流升到4a（安培）后再關(guān)掉，這樣反復(fù)開關(guān)（0-20） 左右直到蒸氣從塑料管內(nèi)噴出，讓其噴半分鐘左右，關(guān)掉蒸氣開關(guān)，儀器進(jìn)入正 常的待機狀態(tài)。 3、樣品測定 （1）取錐形瓶+2%硼酸10ml+混合指示劑1-2滴放在定氮儀的托

蛋白質(zhì)與酶工程是高校生物類專業(yè)一門重要的課程,生物工程產(chǎn)業(yè)的發(fā)展對高等院校人才的培養(yǎng)提出新的要求,傳統(tǒng)的教學(xué)內(nèi)容與模式已不再滿足當(dāng)今的教學(xué)要求。本文通過優(yōu)化教學(xué)內(nèi)容、改變教學(xué)模式、改進(jìn)實驗教學(xué),改革考核評價方式等教學(xué)改革措施,建立以學(xué)生為主體的創(chuàng)新型、應(yīng)用型人才的教學(xué)模式。

2012年1月17日．受廣東省科技廳的委托，廣東省農(nóng)科院組織專家組對廣東省農(nóng)科院畜牧研究所完成的真菌植酸酶蛋白質(zhì)工程改造、表達(dá)優(yōu)化及其應(yīng)用評價”項目進(jìn)行成果鑒定。會議由該院科技處徐志宏副處長主持，暨南大學(xué)姚冬生教授擔(dān)任鑒定會主任．華南農(nóng)業(yè)大學(xué)楊琳教授擔(dān)任鑒定會副主任，鑒定專家組由廣東科貿(mào)職業(yè)學(xué)院、仲愷農(nóng)業(yè)工程學(xué)院、廣東省微生物研究所、華南師范大學(xué)、廣東省畜牧獸醫(yī)總站的專家組成，

針對蝴蝶蘭葉片蛋白質(zhì)含量少且含有大量色素和酚等干擾物質(zhì)的特點,通過對總蛋白提取方法、銀染方法的改進(jìn),以及雙向電泳實驗條件的比較選擇,初步建立一套適用于蝴蝶蘭葉片蛋白質(zhì)組分析的雙向電泳技術(shù)。

采用油水乳化法,以環(huán)己烷和碳酸鈣微粒復(fù)合致孔,以6%的瓊脂糖凝膠包裹玻璃珠,制備出大孔薄層瓊脂糖凝膠-玻璃珠復(fù)合介質(zhì),其密度為1.7g.ml-1,平均粒徑為127.8μm,在其上接枝二乙胺基乙基制備成陰離子交換介質(zhì),進(jìn)行了牛血清白蛋白的吸附實驗.對比實驗結(jié)果表明此大孔薄層介質(zhì)具有較好的吸附容量和良好的傳質(zhì)特性.